Repository of Research and Investigative Information

Repository of Research and Investigative Information

Ahvaz Jundishapur University of Medical Sciences

جداسازی و شناسایی سویه های انتروباکتریاسه های مقاوم به کارباپنم ها، و جستجوی ژن های NDM, IMP,KPC در این سویه ها در بیماران بستری در بیمارستان های گلستان و امام خمینی شهر اهواز. Isolation and Identification of Carbapenem-Resistant Enterobacteriaceae Isolates, looking for NDM, IMP , KPC Genes in Hospitalized Patients of The Imam Khomeini and Golestan Hospitals in Ahvaz, Iran.

کرایی, درسا (2016) جداسازی و شناسایی سویه های انتروباکتریاسه های مقاوم به کارباپنم ها، و جستجوی ژن های NDM, IMP,KPC در این سویه ها در بیماران بستری در بیمارستان های گلستان و امام خمینی شهر اهواز. Isolation and Identification of Carbapenem-Resistant Enterobacteriaceae Isolates, looking for NDM, IMP , KPC Genes in Hospitalized Patients of The Imam Khomeini and Golestan Hospitals in Ahvaz, Iran. Masters thesis, دانشگاه علوم پزشکی جندی شاپور اهواز، اهواز، ایران Ahvaz Jundishapur University of Medical Sciences, Ahvaz, Iran,School of Medicine دانشکده پزشکی

[img]
Preview
Text
128351-20.pdf

Download (1MB) | Preview

Abstract

زمینه و هدف: اعضای خانواده انتروباکتریاسه، باسیل های گرم منفی می باشند که بطور نرمال جزء فلور طبیعی روده و از پاتوژن های شایع انسانی محسوب می شوند. آنتی بیوتیک های کرباپنم (ایمی پنم، مروپنم، ارتاپنم و دوری پنم ) از آنتی بیوتیک های بتالاکتام محسوب می شنود که می توانند نقش مهمی در درمان عفونت هایی با مقاومت چند گانه و شدید ایفا کنند. امروزه به دلیل استفاده زیاد و نا مناسب از این دارو ها، افزایش مقاومت نسبت به کارباپنم ها مشاهده می شود. تولید آنزیم های کرباپنماز مهمترین مکانیسم مقاومت نسبت به کارباپنم ها محسوب می شود، زیرا این آنزیم ها روی عناصر ژنتیکی متحرک نظیر پلاسمید ها قرار گرفته اند و می توانند به سرعت در بین باکتری های گرم منفی توزیع گردند. هدف از این مطالعه توصیف الگوی مقاومت آنتی بیوتیکی در ایزوله های بالینی اعضای خانواده انتروباکتریاسه و تعیین تست فنوتیپی دیسک ترکیبی در شناسایی سویه های تولید کننده ی آنزیم کارباپنماز و بررسی وجود ژن های کد کننده آنزیم های کرباپنماز با استفاده از تکنیک PCR می باشد. روش بررسی: در این مطالعه، 726 ایزوله انتروباکتریاسه از نمونه های مختلف بیماران در 2 بیمارستان آموزشی شهر اهواز جدا سازی گردید. ایزوله ها بعد از شناسایی اولیه با آزمایشات بیوشیمیایی استاندارد تعیین هویت شدند. حساسیت آنتی بیوتیکی ایزوله ها با استفاده از روش دیسک دیفیوژن آگار مطابق با استاندارد های CLSI برای 8 آنتی بیوتیک مختلف تعیین شد. در سویه هایی که با روش دیسک دیفیوژن آگار نسبت به آنتی بیوتیک های ایمی پنم، مروپنم و ارتاپنم مقاوم بودند، تولید آنزیم های کرباپنماز به صورت فنوتیپی با دیسک ترکیبی مورد بررسی قرار گرفت. سپس در ایزوله های مقاوم، با استفاده از تکنیک PCR، وجود ژن های IMP، KPC و NDM کد کننده کرباپنماز مورد شناسایی قرار گرفتند. یافته ها: اشریشیا کلی (8/51 درصد )، گونه های انتروباکتر ( 7/23 درصد) و گونه های کلبسیلا ( 3/13 درصد) به ترتیب بیشترین ایزوله از نمونه های بالینی بودند. نتایج آنتی بیوگرام ایزوله های جمع آوری شده نشان داد که میزان مقاومت به ترتیب نسبت به آنتی بیوتیک های سفتریاکسون ( 4/38 درصد)، سفوتاکسیم (0/37 درصد)، سفتی زوکسیم ( 3/34 درصد) و سفتازدیم ( 5/33 درصد) بیشتر بوده است، همچنین بیشترین حساسیت به ترتیب مربوط به آنتی بیوتیک های ایمی پنم (0/92 درصد) ، مروپنم (9/88 درصد) و ارتاپنم ( 2/88 درصد) بوده است. از72 سویه ای که به روش دیسک دیفیوژن نسبت به کارباپنم ها غیر حساس بودند، 62 سویه به روش فنوتیپی دیسک ترکیبی از نظر وجود آنزیم های کارباپنماز مثبت شدند. در این مطالعه ژن های IMP، KPC و NDM در هیچکدام از سویه ها یافت نشد. نتیجه گیری: نتایج این مطالعه مقاومت های چند گانه ی ایزوله های انتروباکتریاسه را در عفونت ها نشان می دهد. گسترش ایزوله های مقاوم به کارباپنم نگرانی فزاینده ای را در سال های اخیر ایجاد کرده است، زیرا این آنتی بیوتیک ها به عنوان آخرین خط دارویی برای درمان عفونت های ناشی از باسیل های گرم منفی از جمله اعضای خانواده ی انتروباکتریاسه استفاده می شود. روش دیسک ترکیبی در آزمایشگاه های میکروبشناسی برای شناسایی وجود کارباپنماز در باکتری های گرم منفی می تواند به عنوان یک روش ساده و روتین مورد استفاده قرار بگیرد. The Enterobacteriaceae are rod-shaped Gram- negative bacteria which are a part of the normal flora and are the most common human pathogens. Carbapenem antibiotics (Imipenem, Meropenem, Ertapenem), are a subtype of beta-lactam antibiotics, which can play an important role in the treatment of severe infections and multi-drug resistant bacteria. According to the excessive and in appropriate use of these drugs, we are witnessing the increase of resistance to carbapenems. Among all, the most important mechanism of resistance to carbapenems is Carbapenemase production. Since this enzyme is located on mobile genetic elements such as plasmids, they can rapidly spread among gram-negative bacteria. The objective of presant study was to describe the resistance pattern of clinical isolates of Enterobacteriaceae strains and to detect the carbapenemase genes among carbapenem resistant isolates using PCR technic. Methods: A total of 726 Enterobacteriaceae clinical isolates were collected from two major hospitals in Ahvaz city during August 2014 to January 2014. The isolates were identified by standard biochemical tests. Antimicrobial susceptibility patterns were determined using the agar diffusion method for 8 antibiotics according to the CLSI guideline using the Kirby-Bauer disk diffusion assay.The isolates were screened by combined-disk test, including ertapenem and imipenem .The resistant isolates were than evaluated for the presence of carbapenemase genes using PCR tachnic. Results: According to the results of this study, most of the clinical isolates among Enterobacteriaceae were Escherichia coli (51.8 %),Enterobacter species (23.7%),and Klebsiella spp (13.3%), showed the highest role in infection, respectively. These organisms showed the highest level resistance to Ceftriaxone ( 38.4 %), Cefotaxime ( 37.0 %), Ceftizoxime (34.3 %), Ceftazidime ( 33.5 %), Cefepime (32.3 %), Ertapenem (9.9 %), Meropenem ( 8.9 %) and Imipenem ( 7.1 %) . Out of a total 72 isolates which were showing non-susceptible zone for Ertapenem, Meropenem and Imipenem 62 ( 8.5 %) were positive by combined-disk test. None of the metalo-beta-lactamase positive isolates were positive for IMP, KPC and NDM genes. Conclusion: According to our results, there was a high resistance of Enterobacteriaceae isolates to the third generation of cephalosporins and carbapenem antibiotics. In antibiogram tests, supervision and also prescription of susceptible antibiotics could prevent spread of carbapenem­resistant Enterobacteriaceae and other of ESBLs­producing isolates.

Item Type: Thesis (Masters)
Keywords: انتروباکتریاسه، مقاومت آنتی بیوتیک، سفالسپورین ها، کرباپنم ها، PCR Antibiotic; Cephalosporin; Carbapenem; Enterobacteriaceae; PCR; Resistance
Subjects: Q Science > QR Microbiology
Divisions: Faculty of Medicine, Health and Life Sciences > School of Medicine
Depositing User: آقای بهرام سوسنی غریب وند
Date Deposited: 23 Apr 2018 06:26
Last Modified: 23 Apr 2018 06:26
URI: http://eprints.ajums.ac.ir/id/eprint/12763

Actions (login required)

View Item View Item