Repository of Research and Investigative Information

Repository of Research and Investigative Information

Ahvaz Jundishapur University of Medical Sciences

تعیین ارزش مارکرهای آنتی ژنی توکسوپلاسما گوندی وارزیابی آنها درتشخیص عفونتهای حاد و مزمن و طراحی روش الایزای خانگی با بکارگیری آنتی ژن سویهRH Characterization of antigenic markers of Toxoplasma gondii and evaluation of them in differential diagnosis of acute and chronic toxoplasmosis and set up a local diagnostic ELISA test using RH strain antigen

محمدپور, نیلوفر (2016) تعیین ارزش مارکرهای آنتی ژنی توکسوپلاسما گوندی وارزیابی آنها درتشخیص عفونتهای حاد و مزمن و طراحی روش الایزای خانگی با بکارگیری آنتی ژن سویهRH Characterization of antigenic markers of Toxoplasma gondii and evaluation of them in differential diagnosis of acute and chronic toxoplasmosis and set up a local diagnostic ELISA test using RH strain antigen. Masters thesis, دانشگاه علوم پزشکی جندی شاپور اهواز، اهواز، ایران Ahvaz Jundishapur University of Medical Sciences, Ahvaz, Iran,دانشکده پزشکی

[img]
Preview
Text
m114061.pdf.pdf

Download (1MB) | Preview

Abstract

مقدمه: تشخیص سرولوژیکی توکسوپلاسموزیس که در اثر آلودگی به انگل توکسوپلاسما گوندی ایجاد می شود، بوسیله تستهای تشخیصی مختلفی صورت می گیرد. عدم وجود یک روش استاندارد در تهیه آنتی ژن حساسیت و اختصاصیت تستهای مختلف را تحت تاثیر قرار می دهد. هدف از این مطالعه ارزیابی کاربرد آنتی ژن تاکی زوئیت سویه RH توکسوپلاسما گوندی (تهیه شده از انستیتو پاستور ایران) با استفاده از روش الایزا و ایمنوبلات در تشخیص توکسوپلاسموزیس انسانی بوده است. مواد و روشها: در بخش طراحی کیت الایزا در مجموع 340 نمونه سرم شامل 100 نمونه از افراد بیمار مبتلا به توکسوپلاسموزیس مزمن و 100 نمونه از افراد مبتلا به توکسوپلاسموزیس حاد که تشخیص آنها با روش الایزای تجاری در آزمایشگاههای تشخیص طبی صورت گرفته بود، 100 نمونه سرم از افراد سالم و 40 نمونه سرم افراد مبتلا به بیماریهای هترولوگ شامل توبرکولوزیس، کیست هیداتیک و سرطان خون بررسی شدند. در آزمایش ایمنوبلات در مجموع 70 نمونه سرم شامل 30 نمونه سرم از افراد مبتلا به توکسوپلاسموزیس مزمن و 30 نمونه سرم از افراد مبتلا به توکسوپلاسموزیس حاد و 10 نمونه سرم از افراد سالم به عنوان کنترل مورد بررسی قرار گرفت.. نتایج: بعد از انجام آزمایش تمام نمونه های سرم به روش الایزا ، از مجموع 100 نمونه سرم افراد مبتلا به توکسوپلاسموزیس مزمن در کیت الایزای خانگی 98 نمونه مثبت و 2 نمونه منفی شدند و در کیت الایزای تجاری 100 درصد نمونه ها مثبت شدند. بنابراین حساسیت و ویژگی کیت الایزای خانگی 98 درصد و 100 درصد و کیت الایزای تجاری 100 و 100 درصد بدست آمد و از مجموع 100 نمونه سرم افراد مبتلا به توکسوپلاسموزیس حاد در کیت الایزای خانگی 99 نمونه مثبت و 1 نمونه منفی شدند و در کیت الایزای تجاری 100 درصد نمونه ها مثبت شدند. بنابراین حساسیت و ویژگی کیت الایزای خانگی 99 درصد و 100 درصد و کیت الایزای تجاری 100 درصد و 100 درصد تعیین شد. حساسیت و ویژگی سرمهای هترولوگ با IgG ضد توکسوپلاسما گوندی 100 و 100 درصد بدست آمد. حساسیت سرمهای هترولوگ با IgM ضد توکسوپلاسما گوندی 100 درصد و ویژگی آن در توبرکولوزیس 16.7 درصد، در کیست هیداتیک 21.4 درصد و در سرطان خون 28.6 درصد بدست آمد. آنتی ژن تاکی زوئیت سویه RH توکسوپلاسما گوندی در روش SDS-PAGE شامل 14 باند آنتی ژنی در محدوده 10-170 کیلودالتون بود، که در آزمایش ایمنوبلات با نمونه های سرم واکنش نشان دادند. در آزمایش ایمنوبلات از مجموع 60 نمونه، 30 سرم از افراد مبتلا به توکسوپلاسموزیس مزمن باندهای12، 28و 41 کیلودالتون را نشان دادند بنابراین حساسیت تست 100 درصد و 15 نمونه باندهای 72 و 130 کیلودالتون را نشان دادند بنابراین حساسیت تست 50درصد و ویژگی آن 100 درصد تعیین شد. 30 سرم از افراد مبتلا به توکسوپلاسموزیس حاد باندهای 10 و 41 کیلودالتون را نشان دادند بنابراین حساسیت تست 100 درصد و ویزگی آن100درصد تعیین شد. . با توجه به نتایج این مطالعه به نظر می رسد که آنتی ژن تاکی زوئیت سویه RH توکسوپلاسما گوندی می تواند یک منبع بسیار مناسب آنتی ژن در تشخیص سرولوژی توکسوپلاسموزیس انسانی باشد Serological diagnosis of toxoplasmosis (caused by Toxoplasma gondii) has been performed by different techniques. The lack of a standard method for antigen preparation affect the sensitivity and specificity of the tests. Aim of this work was to assess the usefulness of RH strain of Toxoplasma gondii tachyzoite (obtained from Pasteur Institute of Tehran) using ELISA and Immunoblot techniques. At overall we tested 340 serum samples comprising: 100 sera from chronic toxoplasmosis, 100 sera from acute toxoplasmosis and 100 sera from healthy individuals and 40 heterologous sera an example tuberculosis, hydatid cyst and blood cancer were evaluated. In house-ELISA kit 98 samples of chronic toxoplasmosis sera showed positive result and 2 samples showed negative result therefore the sensitivity and specificity obtained 98% and 100% respectively. In house-ELISA kit 99 samples of acute toxoplasmosis sera showed positive result and 1 sample showed negative result therefore the sensitivity and specificity obtained 99% and 100% respectively, whereas the sensitivity and specificity of commercial kit obtained 100%. In house-ELISA kit 40 samples of heterologous sera with anti-Toxoplasma gondii IgG showed positive result therefore the sensitivity and specificity obtained 100% and 100% respectively, the sensitivity of 40 samples of heterologous sera with anti-Toxoplasma gondii IgM obtained 100% and the specificity showed 16.7% in tuberculosis, 21.4% in hydatid cyst and 28.6% in blood cancer. RH strain of Toxoplasma gondii after electrophoresis by SDS-PAGE showed 14 antigenic band of 9-130 KDa that reacted with serum samples. In immunoblot test 60 samples of chronic and acute toxoplasmosis sera showed positive reaction with antigenic bands. In chronic toxoplasmosis the 12, 28 and 41 KDa showed sensitivity 100% and specificity 100% and 72 and 130 KDa showed sensitivity 50% and specificity 100% respectively. In acute toxoplasmosis the 10 and 41 KDa showed sensitivity and specificity 100% and 100% respectively. In conclusion RH strain of Toxoplasma gondii may be considered as a good source of antigenic component in serological techniques. It may be adventages to use combined assessment of ELISA and Immunoblotfor confirmation the laboratory diagnosis of human toxoplasmosis, and 12, 10 KDa antigen are the best fraction of RH strain of Toxoplasma gondii in immunological tests

Item Type: Thesis (Masters)
Keywords: توکسوپلاسما گوندی، مرحله مزمن ، مرحله حاد، الایزای خانگی، ایمنوبلات، آنتی ژن سویه RH. Toxoplasma gondii, Chronic stage, Acute stage, House-ELISA, Immunoblot, RH strain antigen.
Subjects: Q Science > QR Microbiology
Divisions: Faculty of Medicine, Health and Life Sciences > School of Medicine
Depositing User: آقای بهرام سوسنی غریب وند
Date Deposited: 26 Mar 2017 04:28
Last Modified: 26 Mar 2017 04:28
URI: http://eprints.ajums.ac.ir/id/eprint/3610

Actions (login required)

View Item View Item