Repository of Research and Investigative Information

Repository of Research and Investigative Information

Ahvaz Jundishapur University of Medical Sciences

بررسی توکسوپلاسموزیس در بیماران HIV+ با روشهای سرولوژی و مولکولی در جنوب غرب ایران Prevalence study of acute and chronic Toxoplasmosis in HIV-infected patients by serological and molecular techniques

شفیعی نیا, شهلا (2015) بررسی توکسوپلاسموزیس در بیماران HIV+ با روشهای سرولوژی و مولکولی در جنوب غرب ایران Prevalence study of acute and chronic Toxoplasmosis in HIV-infected patients by serological and molecular techniques. Masters thesis, دانشگاه علوم پزشکی جندی شاپور اهواز، اهواز، ایران Ahvaz Jundishapur University of Medical Sciences, Ahvaz, Iran,School of Medicine دانشکده پزشکی

[img]
Preview
Text
m110650.pdf.pdf

Download (814kB) | Preview

Abstract

مقدمه: عفونت اکتسابی توکسوپلاسموزیس تحت عنوان یک عارضه جدی در بیماران مبتلا به HIV شناخته شده است. تشخیص سرولوژیک کلاسیک بیماری متکی بر تشخیص ایمونوگلوبولین¬های ضد توکسوپلاسما است؛ با این حال ممکن است تشخیص سرولوژیک در بیماران دچار ضعف سیستم ایمنی مثل افراد مبتلا به HIV که موفق به تولید تیتر آنتی¬بادی اختصاصی قابل-توجهی نیستند، قابل اعتماد نباشد. روش PCR امکان تشخیص سریع عفونت توکسوپلاسمایی را فراهم مینماید بنابراین علاوه بر تشخیص سرولوژیک به روش مولکولی نیز برای تشخیص توکسوپلاسموز در بیماران مبتلا به HIV نیاز است. هدف: بررسی شیوع توکسوپلاسموزیس حاد و مزمن در بیماران مبتلا به HIV با روش¬های سرولوژی و مولکولی مواد و روش¬ها: در این مطالعه توصیفی مقطعی از 379 مراجعه کننده¬ی مبتلا به HIV در جنوب غرب ایران، بعنوان گروه هدف، نمونه خون محیطی تهیه شد. ابتدا با روش ELISA وضعیت آنتی¬بادی¬های IgG و IgM در نمونه¬های سرمی بررسی شد و سپس با روش IgG آویدیتی فاز حاد و مزمن بودن آنتی¬بادی IgG بررسی شد. سپس با روش Nested PCR انگل توکسوپلاسما در نمونه خون افرادی که در فاز حاد بیماری بودند جستجو شد. به منظور تاٌیید نتایج PCR و پی بردن به توالی نوکلئوتیدی، تعداد11 نمونه محصول PCR بطور تصادفی انتخاب و در کشور کره جنوبی تعیین توالی شده و در بانک جهانی ژن ثبت شدند. نتایج: از میان 379 بیمار مبتلا بهHIV، در آزمایش الایزا 131 مورد (5/34 درصد) آنتی¬بادی IgG مثبت و 12 مورد (1/3 درصد) علاوه بر آنتی¬بادیIgG، آنتی¬بادی IgM مثبت نیز بودند. میانگین لنفوسیت¬های CD4+ T در افراد سرولوژی مثبت 3/325 و در افراد سرولوژی منفی 4/405 بود. از نظر آماری بین تعداد لنفوسیت¬های CD4+ T کمتر از 200 و مثبت بودن آنتی¬بادی IgG رابطه معناداری وجود دارد (038/0 .(P =برای131 نمونه¬ایی که آنتی¬بادی IgG مثبت داشتند، تست IgG آویدیتی انجام شد، که 43 مورد (8/32درصد) نشاندهنده مرحله حاد آنتی¬بادی و 88 مورد (1/67 درصد) نشانده مرحله مزمن آنتی¬بادی میباشند. سپس جهت 43 بیماری که درتست IgG آویدیتی نشاندهنده مرحله حاد بیماری بودند، تست Nested PCR انجام شد که تمامی43 بیمار مثبت شدند. همچنین جهت 7 مورد از بیمارانی که از نظر سرولوژی IgG مثبت بودند اما درتست IgG آویدیتی نشاندهنده مرحله مزمن بیماری بودند نیز تست Nested PCR انجام شد که 2 مورد مثبت شد، و 5 مورد منفی شد. در مجموع از 50 نمونه¬ای که تست PCR انجام شد 45مورد (90درصد) مثبت و 5 مورد (10درصد) منفی شد. نتیجه¬گیری: این مطالعه میزان شیوع بالای توکسوپلاسموزیس حاد را در افراد مبتلا به HIV نشان میدهد. نتایج روش سرولوژی IgG آویدیتی و Nested PCR در شناسائی توکسوپلاسموزیس حاد در مبتلایان به HIV همپوشانی بالای 90% را نشان داد. در نتیجه روش IgG avidity در تشخیص فاز حاد بیماری توکسوپلاسموزیس در افراد مبتلا به HIV میتواند قابل اعتماد باشد. Introduction: Recent acquired or reactivation Toxoplasma. Gondii (T.g) infection is a serious complication in HIV patients. Classical serological diagnosis relies on the detection of anti- toxoplasma immunoglobulin; however, serology may be unreliable in HIV immunodeficient patients who fail to produce significant titers of specific antibodies. PCR assays allow a rapid diagnosis of T.g infection. So in addition to serological diagnosis, the molecular technique is also required to detect of Toxoplasmosis in HIV-infected patients. Purpose: study of Prevalence Toxoplasmosis in HIV-infected patients by serological and molecular techniques Materials and methods: Blood samples were collected from Three hundred seventy-nine HIV-infected patients as a target participants. Anti- T.g IgG antibodies and anti-T.g IgM antibodies were investigated by ELISA and IgG avidity test. The presence of Toxoplasma in the blood samples was evaluated by Nested PCR. Samples that had formed the best band on agarose gel electrophoresis were sent to Bioneer Corporation of Korea to determine their nucleotide sequence. Results: Among the 379 HIV-positive patients, 131 (5.34 %) were positive for Anti- T.g IgG antibodies and 12 (1.3 %) were positive for anti-T.g IgM antibodies too. The Mean CD4+ T lymphocytes titers were 325.3 and 405.4 in seropositive and seronegative patients, respectively. The relationship between patients who had CD4 + T counts less than 200 and IgG-positive patients was statistically significant (P= 0.038). In IgG avidity test, 43 (32.82%) and 88 (67.17%) had antibodies indicating acute phase and chronic phase, respectively. The Nested PCR results were indicative of T.g parasite in 43 (100%) patients of among the 43 IgG antibody-positive patients with acute infection. Among the 7 IgG antibody-positive patients with chronic infection, 2 (0.028%) patients were indicative of T.g and 5 (0.71%) patients were not indicative of T.g in PCR. A total of 50 cases, 45 (90%) were T.g-positive and 5 (10%) were T.g-negative in Nested PCR. Discussion: This study showed the higher prevalence of toxoplasmosis in HIV-positive patients compared to healthy participants. Results of serological techniques had a higher overlap with Nested PCR in identifying T. gondii in seropositive patients.

Item Type: Thesis (Masters)
Keywords: HIV، توکسوپلاسموزیس، الایزا، IgG آویدیتی، Nested PCR Toxoplasmosis, HIV, ELISA, IgG avidity, Nested PCR
Subjects: Q Science > QR Microbiology
Divisions: Faculty of Medicine, Health and Life Sciences > School of Medicine
Depositing User: آقای بهرام سوسنی غریب وند
Date Deposited: 14 Apr 2017 13:18
Last Modified: 14 Apr 2017 13:18
URI: http://eprints.ajums.ac.ir/id/eprint/4693

Actions (login required)

View Item View Item