Repository of Research and Investigative Information

Repository of Research and Investigative Information

Ahvaz Jundishapur University of Medical Sciences

شناسایی ساختار بیوفیلم استافیلوکوکوس اپیدرمیدیس جدا شده از کاتترهای تنفسی بیماران بستری در بیمارستان و بررسی اثر آنتی¬بادی¬های ضد پروتئین SesC بر روی تشکیل بیوفیلم Detection of biofilm phenotype of isolated Staphylococcus epidermidis from respiratory catheters of hospitalized patients and evaluation the effect of antibodies against SesC protein on biofilm formation

سمیعی فر, شهلا (2015) شناسایی ساختار بیوفیلم استافیلوکوکوس اپیدرمیدیس جدا شده از کاتترهای تنفسی بیماران بستری در بیمارستان و بررسی اثر آنتی¬بادی¬های ضد پروتئین SesC بر روی تشکیل بیوفیلم Detection of biofilm phenotype of isolated Staphylococcus epidermidis from respiratory catheters of hospitalized patients and evaluation the effect of antibodies against SesC protein on biofilm formation. Masters thesis, دانشگاه علوم پزشکی جندی شاپور اهواز,دانشکده بهداشت

[img]
Preview
Text
m109254.pdf.pdf

Download (1MB) | Preview

Abstract

مقدمه: استافیلوکوکوس اپیدرمیدیس مسئول اغلب عفونت¬های مرتبط با اجسام خارجی خصوصاَ عفونت¬های مرتبط با کاتتر است. مهمترین ویژگی بیماریزایی آن، قابلیت¬ برای اتصال به مواد و تولید یک بیوفیلم میباشد. حضور اجزای سطحی استافیلوکوکوس اپیدرمیدیس خصوصاَ پروتئین SesC برای تشکیل بیوفیلم ضروری است . هدف: شناسایی ساختار بیوفیلم استافیلوکوکوس اپیدرمیدیس و بررسی اثر آنتی¬بادی¬های ضد پروتئین SesC بر روی تشکیل بیوفیلم آنها مواد و روش¬ها: مجموعاَ350 نمونه کاتترهای تنفسی از بیماران بستری در بخش ICUچهار بیمارستان آموزشی دانشگاه علوم پزشکی جندی¬شاپور اهواز جمع آوری گردید. شناسایی سویه¬های استافیلوکوک¬های کوآگولاز منفی با استفاده از تست¬های بیوشیمیایی افتراقی انجام گردید. سویه¬های استافیلوکوکوس اپیدرمیدیس با مس اسپکترومتری تعیین هویت گردیدند. سپس تشکیل بیوفیلم ایزوله¬ها به روش نیمه کمی در پلیت کشت سلول انجام گردید. نوع بیوفیلم نیز براساس تبعیت از مکانیسم پلی-ساکاریدی یا پروتئینی در تولید بیوفیلم با استفاده از اثر سدیم متاپریودیت و پروتئیناز ک بر روی بیوفیلم¬ها مشخص گردید. اثر آنتی¬بادی ضد پروتئین SesC بر روی تشکیل بیوفیلم¬ها¬ نیز بررسی گردید. سرانجام اثر آنتی¬بادی SesC بر روی تشکیل بیوفیلم در مقایسه با کنترل¬های منفی آزمایش و با استفاده از آنالیزTWO-WAY ANOVA تحلیل گردید. نتایج: از مجموع 350 نمونه بالینی، 70 سویه استافیلوکوک¬های کوآگولاز منفی جداسازی گردید. 40 ایزوله¬¬ بطور تصادفی از میان کوآگولاز منفی¬ها جهت ادامه کار انتخاب گردید. از میان 40 ایزوله مذکور، 20 (50%) سویه¬ استافیلوکوکوس اپیدرمیدیس تعیین شد. 6 ایزوله (30%) ¬ تولید بیوفیلم¬ وابسته به عوامل پلی¬ساکاریدی و 8 ایزوله (40%) تولید بیوفیلم¬ وابسته به عوامل پروتئینی نمودند. در 40% موارد، آنتی¬بادی¬های ضد پروتئین SesC بر روی تشکیل بیوفیلم خصوصاَ بیوفیلم¬های پروتئینی اثر مهاری قابل توجه¬ای نشان دادند (0.05>P). نتیجه¬گیری کلی: نیمی از استافیلوکوک¬های کوآگولاز منفی جداسازی شده، سویه استافیلوکوکوس اپیدرمیدیس بودند، که اکثر آنها قادر به تشکیل بیوفیلم بودند. اگر چه، نقش دقیق SesC در تشکیل بیوفیلم هنوز ناشناخته است اما یافته¬های ما نشان از اهمیت پروتئین SesC در توسعه تشکیل بیوفیلم بر روی کاتتر تنفسی دارد. بنابراین یافته¬های این تحقیق می¬تواند در توسعه و تولید واکسن و استفاده از روش¬های پیشگیری برای حذف باکتری، بویژه در بیماران در معرض خطر، مورد استفاده قرار گیرد. Introduction: Staphylococcus epidermidis account for the majority of foreign body-related infections (FBRIs) particularly catheter-related infections. Its ability to adhere to materials and to promote formation of a biofilm is the most important feature of its pathogenicity. The presence of S.epidermidis surface components particularly SesC protein is essential for biofilm formation. Purpose: The aim of this study is detection of structure of S.epidermidis biofilm isolated from respiratory catheters of hospitalized patients and evaluation of the effect of antibodies against the SesC protein on biofilm formation. Materials and Methods: The coagulase-negative staphylococci (CoNS) strains were isolated from respiratory catheters samples (n=350) using differential biochemical tests. S.epidermidis strains were identified by Mass spectrometry. After identifying the bacteria produced biofilms by using a semi quantitative adherence assay on microtiter plate, the effects of sodium metaperiodate (SM) and proteinase K (PK) on biofilm formation were evaluated in another plate. The effect of antibodies against SesC protein on biofilm formation were evaluated too. Finally, the effect of antibodies on biofilm formation were analyzed in comparison with the negative control by TWO-Way ANOVA analysis. Results: In this study, were isolated 70 CoNS strains. Then, 40 isolates of these strains were randomly selected; Twenty (50%) S.epidermidis strains were identified by Mass spectrometry from all 40 isolates. Six isolates (30%) produced dissolvable PIA-dependent biofilms in SM after growth in Tryptic soy broth (TSB) with NaCl and eight isolates (40%) produced dissolvable protein-dependent biofilms in PK after growth in TSB with glucose. In 40% of cases, anti-SesC antibodies had significant inhibitory effect on biofilm formation (P< 0.05) in particular on protein-dependent biofilms. Discussion: S. epidermidis strains had the highest frequency among all the isolated CoNS strains. Most of these strains were able to form biofilm. Although, the exact role of SesC in biofilm formation still is unknown but our findings display the importance of SesC protein on developing of biofilm formation of respiratory catheters. Therfore, findings of this study can be used in developing vaccine and other prevention methods to remove these bacteria, especially in high-risk patients.

Item Type: Thesis (Masters)
Keywords: Staphylococcus epidermidis, biofilm, SesC protein, respiratory catheters استافیلوکوکوس اپیدرمیدیس، بیوفیلم، پروتئین SesC، کاتتر تنفسی
Subjects: Q Science > QR Microbiology
Divisions: Faculty of Medicine, Health and Life Sciences > School of Medicine
Depositing User: آقای بهرام سوسنی غریب وند
Date Deposited: 20 May 2017 05:23
Last Modified: 20 May 2017 05:23
URI: http://eprints.ajums.ac.ir/id/eprint/7641

Actions (login required)

View Item View Item