Repository of Research and Investigative Information

Repository of Research and Investigative Information

Ahvaz Jundishapur University of Medical Sciences

بررسی اثر کاشت سلولهای بنیادی اسپرماتوگونیال مشتق از بیضه موش بر میزان اسپرماتوژنز بیضه دتورت شده در مرحله ایسکمی متوسط ناشی از تورشن ۲ ساعته، در موشهای نر همسان در مقایسه گروههای شاهد و کنترل نرمال

اسفندیاری, فاطمه (2015) بررسی اثر کاشت سلولهای بنیادی اسپرماتوگونیال مشتق از بیضه موش بر میزان اسپرماتوژنز بیضه دتورت شده در مرحله ایسکمی متوسط ناشی از تورشن ۲ ساعته، در موشهای نر همسان در مقایسه گروههای شاهد و کنترل نرمال. Doctoral thesis, دانشگاه علوم پزشکی و خدمات بهداشتی درمانی جندی شاپور اهواز,پزشکی

[img]
Preview
Text
m100312.pdf

Download (992kB) | Preview

Abstract

مقدمه: دراین مطالعه تاثیر درمانی تزریق سلولهاي بنيادي اسپرماتوگونیال مشتق ازبیضه برروند اسپرماتوژنز بيضه دتورت شده درمرحله ایسکمی متوسط، ناشی از تورشن 2 ساعته در موش نر، توسط ردیابی سلول های بنیادی نشان دارشده و بررسی وزن بیضه ومطالعات بافت شناسی بیضه و پارامترهای اسپرم(از قبیل: تعداد،تحرک،درصد بقا و شکل آن)در مقایسه باگروه شاهد و کنترل نرمال ارزیابی شد. مواد و روش ها: 14موش نرهمسان بالغ مورد آزمایش قرار گرفتند. پس از ایجاد تورشن 2 ساعته دربیضه چپ وایجاد ایسکمی متوسط، موش ها به طور تصادفی به دو گروه 7 تایی تقسیم شدند. بیضه راست موشهای مورد آزمایش به عنوان کنترل نرمال( بدون ایجاد تورشن) در نظر گرفته شد.گروه شاهد(کنترل مثبت):موش های با بیضه چپ دتورت شده و بدون مداخله درمانی،گروه سلول درمانی(تست): موش های با بیضه چپ دتورت شده که 1 هفته بعد با تزریق تعداد 105 سلول بنیادی اسپرماتوگونیال در ِافرنت داکت (مجرای وابران) بیضه درمان شدند. میزان بهبودی توسط شاخص های وزن بیضه ومطالعات بافت شناسی بیضه، و پارامترهای اسپرم(از قبیل: تعداد،تحرک،درصد بقا و شکل آن) و ردیابی مهاجرت و تکامل سلولهای بنیادی اسپرماتوگونیال نشان دار شده با رنگ فلورسنت لیپوفیل Dil- dye ارزیابی گردید. یافته ها: نتایج پیوند سلولهای بنیادی اسپرماتوگونیا ل پس از گذشت 8 هفته در گروه سلول درمانی با مشاهده سلولهای نشاندار شده در قاعده لوله های سمینیفروس و سایر قسمتهای لوله و افزایش سلول های زایای خود بیضه ،نسبت به گروه شاهد که سلولهای زایا پس از 8 هفته کاهش چشمگیر داشتند،بصورت موفقیت آمیز ارزیابی گردید. میانگین وزن بیضه در پایان هفته هشتم پس از پیوند در گروه سلول درمانی افزایش یافت و تفاوت معنی داری با گروه نرمال مشاهده نگردید. به علاوه نتايج نشان داد كه در هر دو گروه سلول درمانی وشاهد، وزن بيضه ها تفاوت معني داري (P≤ 0.05) داشت .بررسي¬هاي بافت¬شناسي در گروه های سلول درمانی و شاهد نشان داد که تعداد سلول¬هاي ژرم اسپرماتوگوني در لوله¬هاي سمینیفروس بیضه گیرنده با گذشت زمان بعد از پیوند سلول افزایش معنی داری (P≤ 0.05) نسبت به گروه شاهد داشته است. 8 هفته پس از پيوند، پارامترهاي اسپرم شامل:تعداد، حركت، زنده ماني و موفولوژي اسپرم¬ در اپيديديم گروه هاي سلول درمانی وکنترل نرمال مورد ارزیابی قرار گرفت و تفاوت معنی داری در بین دو گروه مشاهده نشد . نتايج حاصل از شمارش اسپرم نيز نشان داد كه در گروه شاهد تعداد اسپرم شمارش شده در اپيديديم كاهش معني داري (P≤ 0.05) با گروه نرمال دارد، در حالي كه در گروه سلول درمانی اين تفاوت از بين رفته بود.نتايج در بخش درصد بقاء اسپرم هاي شمارش شده در گروه شاهد نشان داد كه اين درصد داراي تفاوت معني داري (P≤ 0.05) با گروه نرمال است ولي در گروه سلول درمانی اين تفاوت معني دار نبود.نتايج مربوط به بررسي شكل اسپرم ها نشان داد كه در هر گروه بين میانگین اسپرم هاي با شكل طبيعي تفاوت معني دار وجود نداشت. به علاوه طبق بررسي هاي انجام شده در بين دو گروه مشخص گرديد كه شكل اسپرم هاي طبيعي در دو گروه سلول درمانی و شاهد نيز تفاوت معني دار نداشت. بحث: به نظر می رسد که سلولهای بنیادی اسپرماتوگونیال مشتق از بیضه موش ،اثر درمانی مثبتی بر روند اسپرماتوژنزو وزن بیضه دتورت شده داشته باشد که این امر ممکن است به سبب توانایی مهاجرت و تکامل سلولهای بنیادی اسپرماتوگونیال تزریق شده درون بیضه موش و القای روند اسپرماتوژنزو جلوگیری از تغییرات ایسکمیک ناشی از تورشن طول کشیده بیضه باشد. Introduction : In this study the therapeutic effects of injection of spermatogonial stem cells derived from the testis on spermatogenesis of detorted testis in moderate ischemic stage , caused by a 2 hour torsion in mice was evaluated .This was done by tracking the labelled stem cells , histological studies, investigatinging testicular weight and sperm parameters (count, motility, viability, morphology) compared to the control group the normal controls. Materials and Methods: 14 adult mice of the same age were tested. After a 2-hour torsion of the left testis and creation of moderate ischemia, the mice were randomly divided into two groups of seven. Right testis of each groups (without torsion) was considered as the normal control . Control group (positive control) consisted of rats with detorted left testicles without intervention therapy. The therapy group (test group ) consisted of mice with detorted left testicles injected with 105 spermatogonial stem cells in efferent ducts one week later. Recovery rate was assessed by histological studies, testes weight, and sperm parameters (count, motility, viability and morphology) and tracking migration and development of spermatogonial stem cells labeled with lipophilic fluorescent dye ( Dil-dye) . Results : The injection of the spermatogonial stem cells was evaluated as successful after 8 weeks in the cell therapy group. This was confirmed by observing the labelled cells in the semineferous tubes and increase of the germ cells of the testicles comparing to the control group in which the germ cells had a dramatic decrease after 8 weeks. Average weight of the testes at the end of the eighth week after transplantation in the treatment group increased significantly and significant difference from normal group was not observed. In addition, the results showed that in both treatment and control groups, testis weight was significantly different (P ≤ 0.05) . Histological evaluation in the treatment and control groups showed that the number of spermatogonia germ cells in seminiferous tubes of the receiver mice showed a significant increase with time after cell transplantation (P ≤ 0.05) compared to the control group. 8 weeks after transplantation, sperm parameters including count, motility, viability and morphology of spermatozoa in the epididymis was evaluated in normal control and cells therapy group and no significant difference was observed between the two groups. The result of the sperm counting survival in the control group showed a significantly higher percentage (P ≤ 0.05) compared to the normal group. However, this difference was not significant in cell therapy group. Results of the study showed that the mean number of sperms with normal morphology in both groups did not differ significantly. In addition, the study showed that the shape of the normal cells in control group and cell therapy group showed no significant difference. Discussion : It seems that spermatogonial stem cells derived from testicles of the mouse has positive treatment effects on spermatogenesis and weight of the detorted testicle . This effect may be due to the ability of the migration and development of the spermatogonial stem cells injected in the testes of the mouse and induction of the spermatogenesis and inhibition of the ischemic changes caused by delayed torsion of the testeis.

Item Type: Thesis (Doctoral)
Keywords: سلولهاي بنيادي اسپرماتوگونیال، تورشن بیضه، دتورشن بیضه، رنگ فلورسنت Dil-dye، Spermatogonial stem cells, Testicular torsion , Testicular detorsion, Flourescent Dil- dye
Subjects: R Medicine > RD Surgery
Divisions: Faculty of Medicine, Health and Life Sciences > School of Medicine
Depositing User: آقای بهرام سوسنی غریب وند
Date Deposited: 29 May 2017 04:19
Last Modified: 31 May 2017 08:53
URI: http://eprints.ajums.ac.ir/id/eprint/8635

Actions (login required)

View Item View Item